Výběr správného kultivačního nádobí je zásadní pro zajištění optimálního růstu buněk a experimentálních výsledků. Při výběru nádob na kultivaci buněk je důležité vzít v úvahu faktory, jako je typ buňky, specifický účel vaší kultury, rozsah kultury, typ kultivačního média, materiály a velikost nádob, povrchové úpravy, víčka pro správné výměnu plynů a jejich kompatibilitu s vaším laboratorním vybavením.
Zde jsou klíčové faktory, které je třeba vzít v úvahu při výběru správné nádoby pro buněčnou kulturu
1. Vyberte nádobu na buněčnou kulturu podle typu buněk
Adherentní buňky
Tyto buňky potřebují povrch, na který se mohou přichytit a rozprostřít. Pro adherentní buňky budete potřebovat cévy s povrchem, který poskytuje dostatek prostoru pro uchycení a růst buněk.
Příklady Baňky, Petriho misky a vícejamkové destičky ošetřené tkáňovou kulturou.
Závěsné články
Tyto buňky rostou plovoucí v médiu, takže povrch se nebere v úvahu.
2. Vyberte nádobu pro buněčnou kulturu na základě velikosti (objemová kapacita)
Kultury malého rozsahu
Pro experimenty v malém měřítku nebo vysoce výkonný screening jsou ideální menší nádoby.
Příklady Vícejamkové destičky (6, 24, 96-buněčné kultivační destičky),
Petriho miskynebo T25 baňky.
Kultury ve velkém měřítku
Pokud potřebujete pěstovat velké množství buněk, jsou lepší větší nádoby nebo bioreaktory.
Příklady T75 a T175 lahve pro buněčné kultury, bioreaktory nebo rotační lahve pro suspenzní buněčné kultury.
3. Vyberte nádobu pro buněčnou kulturu podle povrchové úpravy
Povrchy ošetřené tkáňovou kulturou
Cévy jsou předem ošetřeny, aby podpořily přichycení buněk, díky čemuž jsou vhodné pro typy adherentních buněk. Ty jsou obecně potaženy látkami, jako je kolagen, fibronektin nebo jiné složky extracelulární matrix.
Neupravené povrchy
Ideální pro suspenzní kultury nebo tam, kde buňky nemusí přilnout k povrchu. Obvykle se používají pro buňky, které volně rostou v médiu.
4. Vyberte nádobu pro buněčnou kulturu podle materiálu
Polystyren běžně používaný pro standardní aplikace buněčných kultur. Je čirý, umožňuje snadnou vizuální kontrolu a funguje dobře pro adherentní i suspenzní buňky.
Polykarbonát nebo polypropylen se používají pro určité aplikace bioreaktorů a pro nádoby vyžadující větší flexibilitu nebo specifické povrchové úpravy.
Sklo používané pro standardní tkáňové kultury kvůli ceně a rozbitnosti, skleněné nádoby mohou být vhodné pro specifické aplikace nebo velkoobjemové kultury.
Baňky
Pro obecnou buněčnou kulturu se běžně používají T-láhve (T25, T75, T150). Plochý povrch poskytuje dobrou oblast pro uchycení a růst buněk. Mohou být použity jak pro adherentní buňky, tak pro suspenzní kultury, pokud jsou udržovány vhodné podmínky.
Petriho misky
Společné pro kultury v malém měřítku a pro experimenty, které vyžadují pozorování, jako jsou testy tvorby kolonií.
Vícejamkové destičky
Ty jsou užitečné pro vysoce výkonný screening a experimenty v menším měřítku. Talíře s 6, 12, 24, 48,
96, nebo je k dispozici 384 jamek a jsou ideální pro buněčné testy, uvolňování cytokinů, testování léků a další vysoce výkonné aplikace.
Odstředivé baňky
Používá se pro suspenzní buněčné kultury, zejména ve větších objemech, kde je nutné řízené míchání pro udržení buněčného růstu a zabránění shlukování buněk.
Bioreaktory
Pro velkoobjemovou suspenzní kultivaci umožňují bioreaktory složitější kontrolu nad podmínkami prostředí (např. pH, teplota, okysličení) a používají se pro velkoobjemovou produkci, jako je biofarmaceutická výroba.
6. Vyberte nádobu pro buněčnou kulturu na základě sterility a ventilace
Sterilita
Ujistěte se, že nádoba je sterilní nebo byla sterilizována, aby se zabránilo kontaminaci. Většina komerčních kultivačních nádob je předem sterilizována, ale vždy zkontrolujte obal.
Větrání
Některé nádoby, jako jsou baňky, se dodávají s odvětrávacími uzávěry nebo filtry, které umožňují výměnu vzduchu a zároveň brání kontaminaci. To je nezbytné při kultivaci buněk v podmínkách s vysokou hustotou.
7. Vyberte nádobu pro buněčnou kulturu podle pohodlí použití
Autoklávovatelné vs. jednorázové
Některé kultivační nádoby mohou být autoklávovány pro opětovné použití (např. skleněné láhve, určité plastové lahve), zatímco jiné jsou jednorázové a jednorázové (např. plastové Petriho misky, vícejamkové destičky).
Manipulace a doprava
Zvažte snadnost přenosu buněk mezi cévami. Například vícejamkové destičky mohou vyžadovat specializované destičky pro snadnou manipulaci s vybavením, jako jsou automatické pipetory.
8. Vyberte nádobu pro buněčnou kulturu podle objemu kultivačního média
Vyberte nádobu, která pojme požadovaný objem kultivačního média bez plýtvání zdroji. Pokud se pracuje s velkoobjemovou kulturou, mohou být nutné větší baňky nebo bioreaktory, zatímco menší objemy jsou vhodné pro misky nebo misky pro buněčné kultury.
9. Vyberte nádobu pro buněčnou kulturu na základě nákladů
Jednorázové vs. opakovaně použitelné
Jednorázové plastové nádoby jsou nákladově efektivní a snižují riziko kontaminace, ale pro rozsáhlé operace mohou být drahé. Opakovaně použitelné skleněné nádoby mají vyšší počáteční náklady, ale lze je sterilizovat a opakovaně používat, což je činí ekonomičtějšími pro dlouhodobé používání.
Objemová účinnost
Ujistěte se, že velikost nádoby je vhodná, aby se zabránilo plýtvání materiálem, zejména při použití drahých růstových médií nebo činidel.
10. Vyberte nádobu pro buněčnou kulturu na základě specifických požadavků aplikace
Zobrazování
Pokud potřebujete vizualizovat buňky pod mikroskopem, vyberte nádoby s opticky čirými materiály a vhodnými rozměry pro vaše nastavení zobrazování (např. vícejamkové destičky pro screening s vysokým obsahem nebo misky se skleněným dnem pro zobrazování živých buněk).
Řízená agitace
Pro suspenzní buněčné kultury zvažte rotační baňky nebo bioreaktory, které poskytují řízené míchání, aby se buňky udržely rovnoměrně suspendované.
Závěr
Výběr správné nádoby pro buněčnou kulturu vyžaduje vyvážení několika faktorů, včetně typu buňky, rozsahu kultury, kompatibility materiálu a specifických experimentálních potřeb. Adherentní buňky budou vyžadovat povrchy, které podporují připojení, zatímco suspenzní buňky těží z větších objemů a míchání. Pro práci v malém měřítku mohou postačovat vícejamkové destičky nebo T-láhve, zatímco větší kultury mohou vyžadovat rotační baňky nebo bioreaktory. Vždy se ujistěte, že nádoby splňují vaše požadavky na sterilitu a manipulaci, a zvažte nákladovou efektivitu založenou na vašem použití.
Zvážením těchto faktorů můžete vybrat optimální nádobu, která poskytuje správné podmínky pro vaši buněčnou kulturu a experimentální cíle.