> Blog > Novinky z oboru

Proč buněčná kultura nejprve lýzuje červené krvinky?

2022-12-23

Základní úvod
Lyzát erytrocytů je jednou z nejjednodušších a nejjednodušších metod odstraňování červených krvinek, tedy štěpení červených krvinek lyzátem, který nepoškozuje buňky s jádry a dokáže plně odstranit červené krvinky. Štěpení lyzátu je mírná metoda odstraňování červených krvinek, která se používá hlavně pro separaci a čištění tkáňových buněk rozptýlených enzymatickým trávením, separaci a čištění lymfocytů a odstranění červených krvinek při experimentech s tkáňovými proteiny a nukleovými buňkami. extrakce kyselinou. Tkáňové buňky získané lyzátem červených krvinek červené krvinky neobsahují a lze je dále využít pro primární kultivaci, buněčnou fúzi, průtokovou cytometrii, separaci a extrakci nukleové kyseliny a proteinu atd.

Návod k použití
Vzorek tkáňových buněk
1. Čerstvé tkáně byly štěpeny slinivkou/enzymem nebo kolagenázou a dispergovány do suspenze jednotlivých buněk a supernatant byl odstraněn centrifugací.

2. Vyjměte lyzát ELS z chladničky při 4, přidejte lyzát ELS k buněčnému precipitátu v poměru 1:3-5 (přidejte 3-5 ml lyzátu na 1 ml zhutněných buněk), jemně profoukněte a promíchejte.

3. Centrifugujte při 800-1000 ot./min. po dobu 5-8 minut a zlikvidujte horní červenou čirou tekutinu.

4. Vysrážená část byla shromážděna a 2-3krát odstředěna s Hankovým roztokem nebo bezsérovým kultivačním roztokem.

5, pokud praskání není úplné/kompletní, lze opakovat kroky 2 a 3.

6. Resuspenzní buňky pro následné experimenty; Pokud je RNA extrahována, je nejlepší tak učinit v roztoku připraveném z kroku 4 s použitím DEPC vody

Červené krvinky mají velmi krátký životní cyklus, pouze 120 dní, ale velmi rychle reprodukují krev a v tomto případě jsou zvláště schopné buněčného dělení a jsou to buňky ze všech nejrychleji se dělící, takže tato buňka je velmi cenná, takže je velmi užitečný pro buněčnou kulturu. Je to velmi jednoduché, nemá v sobě žádné organely, jen buněčné membrány a bílkoviny.

Předchozí:Jaké jsou funkce soupravy ELISA?

další:Požadavky na činidla a základní vyjádření koncentrace roztoku.