"Jak všichni víme, PCR je základní experimentální metodou v biochemických laboratořích." Experimentální výsledky jsou vždy neuspokojivé, což může být způsobeno mírnou kontaminací plastového spotřebního materiálu PCR nebo experimentální interferencí způsobenou zavedením inhibitorů. Existuje ještě jeden velmi důležitý důvod: Na výsledky experimentu bude mít velký vliv také nevhodný výběr spotřebního materiálu.
Existuje mnoho důvodů, které ovlivňují výsledky PCR experimentů: obvykle existuje následujících 7 druhů.
1. Primery: Primery jsou klíčem ke specifické reakci PCR a specifita produktů PCR závisí na stupni komplementarity mezi primery a templátovou DNA;
2. Enzym a jeho koncentrace;
3. Kvalita a koncentrace dNTP;
4. Templátová (cílový gen) nukleová kyselina;
5. koncentrace Mg2+;
6. Nastavení teploty a času;
7. Počet cyklů;
8. Vybavení, spotřební materiál atd.
Mezi mnoha ovlivňujícími faktory je spotřební materiál jedním z velmi důležitých a snadno přehlédnutelných faktorů.
Existuje mnoho druhů
Spotřební materiál pro PCR: 8 zkumavek, zkumavky s malým objemem, standardní zkumavky, bez obruby, s poloobrubou, s plnou obrubou a řada destiček PCR a qPCR. Je velmi těžké si vybrat a existuje mnoho běžných problémů, pojďme se podívat na problémy, které si vybere každý
Spotřební materiál pro PCRa jak je řešit?
Proč jsou
Spotřební materiál pro PCRobecně z PP?
Odpověď: Spotřební materiály pro PCR/qPCR jsou obecně vyrobeny z polypropylenu (PP), protože jde o biologicky inertní materiál, povrch není snadné přilnout k biomolekulám a má dobrou chemickou odolnost a teplotní toleranci (lze autoklávovat při 121 stupních) bakterie a také vydrží změny teploty během tepelného cyklování). Tyto materiály jsou obvykle v přímém kontaktu s činidly nebo vzorky, takže během procesu výroby a přípravy je třeba zvolit vysoce kvalitní materiály a dobré techniky zpracování.